Isolierung von Zwiebel-DNA, zum
"anfassen und ansehen"
Material:
Je Arbeitsgruppe:
Becherglas 400ml
Skalpell
Schneidebrettchen
Glasstab
Trichter
Kaffeefilter
Erlenmeyer-Kolben
150ml
Messpipetten
1ml
Messpipetten 10ml
Pipettierhilfen
Für alle:
Wasserbad mit Heizer
Waage
Thermometer
Eisbad
Mixer
Kühlschrank
Messzylinder
50ml
Chemikalien:
Wasser
Spülmittel
Kochsalz
Zwiebel
Eis
Biozym SE (Waschmittelenzyme)
2-Propanol
Vorbereitung:
Kühlung von
2-Propanol und 50 ml Messzylindern im Kühlschrank
Durchführung
1:
Auf der Waage werden 3 g Kochsalz abgewogen.
10 ml Spülmittel und 90 ml Wasser werden in
einem Becherglas gemischt. Darin das abgewogene Kochsalz aufgelöst. Eine mittelgroße Zwiebel wird geviertelt und
anschließend auf dem Schneidebrettchen mit dem Skalpell klein
geschnitten. Die geschnittene Zwiebel wird in das
Becherglas gegeben, und es wird mit dem Glasstab gut durchgerührt.
Beobachtung
1:
Deutung
1:
Das Spülmittel beginnt die Zell-
und Kernhäute zu zerstören.
Durchführung
2:
Das Becherglas wird für 5 min in ein 60 °C
heißes Wasserbad gestellt. In dieser Zeit wird ein Kaffeefilter passend
für den Trichter zugeschnitten.
Beobachtung
2:
Deutung
2:
Durch das heiße Wasser wird die Wirkung des
Spülmittels verstärkt.
Durchführung
3:
Anschließend wird das Glas für 5 min in ein
Eisbad gegeben. Dann wird der Inhalt in den Mixer gegeben und dreimal
kurz gemixt. Die flüssige Mischung wird dann in den Trichter mit dem
Kaffeefilter gegeben. Es werden 50 ml in den Erlenmeyer-Kolben
filtriert.
Beobachtung
3:
Nur der Zellsaft läuft durch den
Filter, die Zellreste bleiben im Filter
zurück.
.
Deutung
3:
Durch den Mixer werden die Zellwände zerrissen und
die Zellflüssigkeit mit dem Erbgut wird freigesetzt. Durch den Filter
werden Zellsaft und Erbgut isoliert.
Durchführung
4:
Dann werden 1 ml Biozym SE mit der Pipette
abgemessen und zu dem Filtrat pipettiert. Das Gemisch wird dann 1 min
lang geschwenkt.
Beobachtung
4:
Deutung
4:
Durch die
Verdauungsstoffe aus dem Waschmittel werden Kohlenhydrate und Eiweiße
zersetzt, das Erbgut wird nicht angegriffen
Durchführung
5:
10 ml des Filtrats werden in einen gekühlten
Messzylinder abgefüllt und mit 10 ml eisgekühltem 2-Propanol
überschichtet. Mit einem Holzstäbchen wird vorsichtig an der
Grenzschicht gerührt.
Beobachtung
5:
An der
Grenzschicht werden weißliche Fäden sichtbar.
Deutung
5:
Das Erbgut der
Zwiebelzellen ist im Alkohol nicht löslich. Der Stoff, aus dem das Erbgut
aufgebaut ist, heißt Desoxyribonukleinsäure (DNS).
